园艺植物组培褐化（什么是植物培养材料褐化现象?采取什么措施可以防止?）

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有什么药品试剂,可以防止植物组织培养过程中的褐化现象?

1、许多植物的组织培养中发现有褐变现象，尤以木本植物组织培养中褐变严重。褐变主要发生在外植体、愈伤组织的继代、悬浮细胞培养、原生质体的分离与培养等。褐变产物不仅使外植体、细胞、培养基等变褐，而且对许多酶有抑制作用，从而影响培养材料的生长与分化，严重时甚至导致死亡。

2、在培养基里里添加PVP是为了抑制外植体褐化的，一般是加5mg/L~10mg/L，希望对你有用。

3、添加抗氧化剂：在培养基中添加适量的抗氧化剂，如维生素C或硫代硫酸钠，可以帮助防止褐化。控制光照：适当的光照可以抑制褐化，因此在培养过程中应适当控制光照强度和时间。温度管理：维持适宜的培养温度，过高或过低的温度都可能促进褐化的发生。

褐化原因褐化主要由酶促和非酶促两种反应引起。酶促褐化是酚酶催化酚类物质形成醌及其聚合物的过程，在有氧条件下发生。植物体内的酚类化合物和多酚氧化酶，特别是木本植物中含量较高，当外植体切割后，细胞完整性破坏，酚类化合物与多酚氧化酶接触，引发酶促褐化。

原因主要分为两类：非酶促褐变：这种褐变是由于细胞受到胁迫或其他不利条件的影响，导致细胞程序化死亡或自然发生的细胞死亡。这种死亡形成的褐变现象并不涉及酚类物质的产生。许多不利条件都可以造成细胞的程序化死亡，但如果采取适当的措施或者愈伤组织适应了胁迫环境，这种褐变就不再发生。

优化培养基：使用低浓度的植物激素，特别是生长素的浓度不宜过高，以减少褐化的发生。控制培养条件：在无菌条件下进行培养，并确保培养基的pH值和氧气供应适宜。及时转移：在组织培养的过程中，及时将外植体转移到新的培养基中，以避免长时间接触旧培养基中的有害物质。

主要有下面两种原因：①非酶促褐变--非酶促褐变是由于细胞受胁迫或其他不利条件影响所造成的细胞程序化死亡或自然发生的细胞死亡，即坏死形成的褐变现象，并不涉及酚类物质的产生.诸多不利条件都可以造成细胞的程序化死亡。但这种褐变若采取适当措施或者愈伤组织适应了胁迫环境就不再发生。

1、②组培室温度：组培室温度控制在20～2℃，可缓解玻璃化现象。另外，采用昼夜变温交替取代恒温也是错的选择。③适当提高培养基中蔗糖含在培养基中添加4％和5％的蔗糖，能分别较好地预防光叶楮和山桐子组培玻璃苗的发生。④调节培养基中植物生长调节剂的浓度和比例。

2、组织培养过程中出现黄化可能由Fe含量不足、培养环境通气不良、激素配比不当、糖用量不足或长时间不转移、pH值变化过大、培养温度不适、光照不足等引起。改进措施包括改善组培条件、降低接种密度、改善瓶内通气状况、调节pH值、控制培养室内温度、增加光照等。

3、在植物组织培养过程中，污染问题是常见的挑战，主要污染类型包括细菌性污染和真菌性污染。细菌性污染的特征表现为培养基或材料附近出现浑浊和云雾状痕迹，通常在接种后1至2天内显现。而真菌性污染则可通过培养瓶内出现白色、黑色或绿色等不同颜色的菌丝块来识别，这一现象多在接种后3至10天出现。

4、植物组织培养过程中常见的污染现象主要包括：培养基灭菌不彻底导致的污染，通常表现为霉菌污染。外植体消毒不彻底引起的污染，可能出现霉菌和细菌污染。外植体携带病毒导致的污染，这种污染难以控制，通常需采用茎尖脱毒等方法进行处理。操作过程中不当行为引起的污染，多数情况下属于细菌性污染。

5、植物组织培养过程中的污染来源主要分为3种，真菌、细菌和组织培养过程中的污染源。在操作过程中，难免有菌落入培养基或植物材料上，而导致污染。另外，不正确操作也会增加污染机率。预防措施：通风，保持室内空气干燥，紫外杀菌等。污染物品和污染培养基不要在培养室近距离开瓶洗刷。